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发酵培养基设计的基本原则

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发酵培养基设计的基本原则

发布日期:2026/1/13 14:07:06 点击:72


发酵培养基是微生物生长繁殖及目标产物合成(如酶、抗生素、有机酸等)的营养基础,其设计直接影响发酵效率、产物产量及成本。设计时需遵循以下基本原则:

 

一、满足微生物的营养需求,适配菌种特性

提供核心营养物质

培养基需包含微生物生长必需的碳源、氮源、无机盐、生长因子(维生素、氨基酸等)和水,且比例需匹配菌种的代谢特性:

 

如细菌通常需要简单碳源(葡萄糖)和无机氮源(铵盐);真菌可能偏好复杂碳源(淀粉)和有机氮源(蛋白胨);

营养缺陷型菌株需额外添加其无法合成的物质(如某种氨基酸)。

适配代谢途径

根据目标产物的合成途径调整营养成分:

 

若产物为初级代谢产物(如乙醇、柠檬酸),需保证碳氮比适宜,满足菌体生长和产物合成同步进行;

若为次级代谢产物(如抗生素),需设计 两段式培养基(前期促生长,后期促产物合成,如降低氮源浓度)。

 

二、利于目标产物的合成与分离

促进产物积累

 

避免营养成分过量导致 分解代谢物阻遏(如葡萄糖过量抑制某些酶或抗生素合成),可采用缓慢释放碳源(如淀粉)或分批补料;

添加诱导剂(如乳糖诱导青霉素酶)或去除抑制剂(如及时中和有机酸发酵中的酸性产物)。

简化下游分离

 

尽量使用易被微生物利用且代谢残留少的成分,减少培养基杂质对产物纯化的干扰(如发酵生产酶时,避免使用过多胶体物质);

控制培养基 pH 缓冲能力,减少发酵过程中酸碱调节带来的盐类积累(如用磷酸盐缓冲体系)。

 

三、原料来源广泛,成本低廉

优先选择工业级原料

发酵规模扩大时,需采用廉价易得的原料替代实验室级试剂:

 

碳源:淀粉、废糖蜜、秸秆水解液等;

氮源:豆饼粉、鱼粉、发酵废液(如味精废液)等;

无机盐:工业级磷酸钾、硫酸镁等。

利用可再生资源

结合环保与成本,使用农业废弃物、食品加工副产物等(如玉米芯、麸皮),降低对粮食原料的依赖。

 

四、理化性质稳定,便于过程控制

控制渗透压与 pH

 

营养物质浓度过高会导致渗透压过高,抑制菌体生长(如高浓度糖或盐),需通过预实验确定适宜浓度;

培养基需具备一定缓冲能力(如添加磷酸盐、碳酸钙),避免发酵过程中 pH 剧烈波动(尤其对 pH 敏感的产物)。

避免有害物质

 

原料中的杂质(如重金属、酚类)可能抑制微生物活性,需预处理去除(如糖蜜脱钙、秸秆水解液脱毒);

避免使用易产生泡沫的成分(如蛋白胨过量),或添加消泡剂(如植物油、聚醚类),防止发酵液溢出和氧传递受阻。

 

五、灭菌稳定性,减少成分破坏

培养基需耐受灭菌过程(如 121℃高压蒸汽灭菌),避免营养成分分解或产生有毒物质:

 

某些热敏性物质(如维生素、氨基酸)需采用过滤除菌或低温灭菌;

 

还原性物质(如亚硫酸盐)灭菌时可能与其他成分反应,需单独灭菌后再混合。

总之,发酵培养基设计需平衡 营养适配性、产物导向性、经济性、可操作性四大核心,通过预实验优化碳氮比、关键营养浓度及理化参数,并结合菌种特性和发酵工艺(如分批、连续发酵)动态调整,最终实现高效、低成本的产物生产。

 

 

 

 

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